CM. Handyfuge-LAMP: centrifugación de bajo costo y sin electricidad para la detección isotérmica de SARS-CoV-2 en saliva. Preprint de Stanford University, 26/07/2020

Department of Bioengineering, Stanford University 2020

Este protocolo LAMP tiene los beneficios de ser simple, no requiere equipo especializado; rápido, que demanda menos de una hora desde la recolección de la muestra hasta la lectura; y barato, cuesta alrededor de $ 1 por reacción usando reactivos comerciales. La lectura colorimétrica basada en el pH también deja poca ambigüedad y es intuitiva. Sin embargo, un déficit en muchos métodos basados ​​en ácido nucleico para la detección en muestras de saliva ha sido la variabilidad en la producción debido a la presencia de sustancias inhibidoras en la saliva. Se demostró que la centrifugación para separar los inhibidores de reacción de la muestra inactivada es una forma efectiva de garantizar una amplificación de LAMP confiable. Sin embargo, una centrífuga capaz de alcanzar de manera segura las velocidades necesarias de 2000 RPM durante varios minutos a menudo cuesta cientos de dólares y requiere una fuente de alimentación. Presentamos aquí una solución de hardware abierta, Handyfuge, que puede ensamblarse con componentes disponibles fácilmente al costo de < 5 dólares por unidad y podrían usarse junto con el ensayo LAMP para la detección en el punto de atención del ARN COVID-19 de la saliva. El dispositivo se valida con el protocolo LAMP de Rabe y Cepko. Con el uso de refrigeradores aislados para la cadena de suministro de reactivos y la entrega, el ensayo presentado se puede completar sin la necesidad de electricidad o infraestructura de laboratorio.

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