El brote de diciembre de 2019 de un nuevo virus respiratorio, el SARS-CoV-2, se convirtió en una pandemia mundial en curso debido en parte al desafío de identificar a los portadores sintomáticos, asintomáticos y presintomáticos del virus. Los diagnósticos CRISPR pueden mejorar las pruebas basadas en PCR estándar de oro si pueden hacerse rápidas, portátiles y precisas. Aquí informamos el desarrollo de un ensayo CRISPR-Cas 13a sin amplificación para la detección directa de SARS-CoV-2 a partir de ARN de hisopado nasal que se puede leer con un microscopio de teléfono móvil. El ensayo logró una sensibilidad de aproximadamente 100 copias / μL en menos de 30 minutos de tiempo de medición y detectó con precisión el ARN extraído previamente de un conjunto de muestras clínicas positivas en menos de 5 minutos. Combinamos crRNA dirigidos al ARN del SARS-CoV-2 para mejorar la sensibilidad y la especificidad, y cuantificamos directamente la carga viral mediante cinética enzimática. Integrado con un dispositivo lector basado en un teléfono móvil, este ensayo tiene el potencial de permitir una detección rápida y de bajo costo en el punto de atención del SARS-CoV-2.
ASPECTOS DESTACADOS
• CRISPR-Cas13a puede detectar cuantitativamente el ARN del SARS-CoV-2 sin preamplificación
• La combinación de ARNr que se dirigen a múltiples regiones del ARN viral mejora la sensibilidad • Cas13a puede cuantificar con precisión y rapidez el ARN del SARS-CoV-2 en muestras de pacientes
• Un teléfono móvil El dispositivo basado en datos permite una lectura portátil y sensible del ensayo
EN BREVE
Fozouni et al., al idear una forma de utilizar CRISPR-Cas13a para detectar y cuantificar el ARN del SARS-CoV-2 a partir de muestras de pacientes, sin la necesidad de un paso de preamplificación. Luego muestran cómo la señal del ensayo se puede detectar de manera eficiente con un dispositivo portátil basado en un teléfono móvil.